В свое время И. В. Мичурин указывал, что ни в коем случае не нужно допускать пересушки семян, так как при этом ухудшается их прорастание и получаются неполноценные всходы. С помощью метода окрашивания удалось объяснить причины снижения жизнеспособности таких пересушенных семян. Как известно, в нормальном семени фасоли порядок поступления воды такой: через хилум к соединительной ткани между хилумом и халазой, через последнюю — в тот участок внутреннего интегумента, который расположен на конце семени, несущем корешок.
Совершенно в ином порядке проникает вода после разрыва оболочки семени в результате быстрого ее поступления. В этом случае между семенной оболочкой и зародышем может создаться запас свободной воды, что ускоряет ее движение в хрупкие ткани еще сухого зародыша. Во время быстрого засасывания воды, получающегося в результате разницы в давлении, часто за счет сил, действующих при набухании, происходит разрыв тканей зародышевых корней, семядолей, гипокотиля, эпикотиля и других частей семени (Moor, 1965).
Мур также показал, что в семенах хлопчатника чаще всего повреждаются кончики корешков, а у сорго — щиток. Обычно повреждение щитка начинается с верхнего конца, где разбухший щиток давит на перикарп. Мур отмечал, что ткани сразу после их повреждения окрашиваются в густой красный цвет, а затем окраска слабеет и наступает полное омертвение поврежденных участков, причем оно начинает распространяться на прилегающие ткани.
Тетразольный метод может быть использован и для установления травмирования семян при уборке, повреждении их морозом (Bennett, Loomis, 1949; Разумная, 1969) и других неблагоприятных воздействиях на семена, а возможно, и на вегетирующие растения.
С помощью окраски удается установить и значение тех или иных частей семени для его прорастания. Например, было показано, что если меристематические клетки корешка и почечки в зародышевой оси не красятся, так как они мертвые, то никакое количество живых клеток в других частях семени не может дать проростка. Другое дело, если мертвые клетки находятся в эндосперме или в семядолях. В этом случае зародыш может дать проросток, но слабый, недоразвитый. Установлено также, что повреждение щитка в семенах кукурузы тормозит их прорастание. По мнению Лакона (Lakon, 1942), это связано или с появлением ингибитора, или с тем, что мертвый щиток образует инфекционный очаг для микроорганизмов, которые и повреждают семя. Накопленные в последние годы факты о важной метаболической роли щитка, связывающего зародыш с эндоспермом (Овчаров, 1969), побуждают усомниться в правильности объяснения Лакона.
Этот метод интересен и для того, чтобы установить локализацию ферментов и тем самым более полно представить их физиологическую роль в жизнедеятельности семян. Нами, например, тетразолий был использован для количественного определения дегидрогеназ при прорастании семян в неблагоприятных условиях и в семенах, обладающих разной жизнеспособностью (Овчаров, 1969; Овчаров, Мурашова, 1973), а также для установления белков, обладающих каталитической активностью, и изоферментов в семенах разной жизнеспособности (Овчаров, Ахмедов, 1973).