Для определения количества или у-каротина, содержащегося в составе микробных пигментов, отрезают соответственно желтую или желто-розовую полосу (каждую в отдельности), измельчают их ножницами и заливают для элюции пигмента 4—6 мл спирта с ацетоном в соотношении 1 :3. Объем элюата измеряют, а затем колориметрируют на фотоэлектроколориметре. Полученный результат пересчитывают на 1 г клеток, учитывая объем экстракта из клеток и элюата из бумаги. При пересчете на сухой вес клеток учитывают влажность биомассы (табл. 51).

Таблица 51
Стерилизация семян перекисью водорода. Партию обрабатываемых семян делят на 2 части. Одну из них в марлевом мешочке погружают на несколько (3—5) минут в воду, затем вынимают и сразу же смешивают со второй половиной семян (сухих). Подготовленные таким образом семена покрывают влажной тряпкой и оставляют на 4—6 часов для оживления эпифитной микрофлоры, имеющейся на семенах. За это время микроорганизмы успевают выйти из состояния анабиоза, а споры— прорасти в вегетативные клетки. Оболочка семян набухает, в результате чего имеющиеся на ней поры приоткрываются. После этого семена помещают в специальную стерильную воронку (рис. 24) и заливают раствором перекиси водорода для стерилизации.
Для разных семян употребляют перекись водорода различной концентрации и выдерживают в ней семена разное время. Концентрация должна быть подобрана так, чтобы семена стали стерильными без снижения всхожести. Можно снизить концентрацию перекиси, но
Показание ФЭК умножают на коэффициент 6,41 для пересчета по сравнению со стандартной кривой раствора каротина.
тогда следует удлинить срок обработки семян. Например, стерильность семян проса достигается или обработкой 15%-ным раствором перекиси в течение 30 минут, или обработкой 10%-ным — в течение 40 минут. Опытным путем установлено, что для достижения стерильности семена кукурузы следует обрабатывать 30%-ной перекисью водорода 20 мин., семена проса 15%-ной — 30 мин., семена ячменя и овса 10%-ной — 30 мин., томата 20%-ной — 45 мин. и т. д.
После выдерживания семян в растворе перекиси ее сливают через нижнюю трубку, открывая зажим, и приступают к промывке семян стерильной водой. Воду наливают в воронку с семенами сверху и сливают снизу. Для соблюдения стерильности удобнее воронку присоединить резиновой трубкой с зажимом Мора к тубусу со стерильной водой. Промывают семена 6—8 раз. Для проверки стерильности их небольшими порциями помещают в пробирки с 1—2 мл жидкой питательной среды (не более), так как под высоким слоем жидкости семена могут задохнуться и потерять всхожесть. Те пробирки с семенами, в которых через 1—2 дня не появится помутнения, считают стерильными. Для работы используют наклюнувшиеся семена.
Стерилизация семян сулемой. При этом методе семена помещают в стерильную-воронку и заливают раство)-ром сулемы, концентрация которой для разных семян различна. Так, для овса и ржи степень разведения 1 : 1000, для кукурузы — 1 : 3000, для огурцов — 1 : 5000. Стерилизуют семена в течение 3 минут. Затем раствор сулемы сливают и семена один раз промывают стерильной «одой. После этого их споласкивают (не более 30 сек.) абсолютным спиртом и промывают 10%-ным раствором спирта.

Рис. 24. Воронка для стерилизации семян.
1 — воронка для обработки семян, 2— кран для слива жидкости.
Воду для приготовления этого раствора предварительно стерилизуют. Одну' партию семян промывают 1 л спиртового раствора. Смену раствора в воронке производят через каждые 5—10 минут.
После промывки спиртом семена промывают 1 л стерильной воды тем же способом, как указано выше. Промытые семена раскладывают на капустный агар или среду № 19 в чашки Петри и проращивают в течение 1 — 2 суток. Такой прием необходим, ибо при этом не только контролируется полнота стерильности семян, но также снимается остаточная токсичность семян благодаря оттягиванию агаром остатков сулемы (катиона ртути) с их поверхности. Для работы используют только наклюнувшиеся семена,