Хроматограмму, обрызганную проявителем, сушат в сушильном шкафу при 60°. В процессе сушки на ней проявляется пятно гетероауксина красно-фиолетового цвета. Контролем для каждого определения служат сделанные этим же методом хроматограммы стерильной питательной среды, используемой для выращивания опытных бактерий. По величине и интенсивности окраски пятен можно судить о количестве гетероауксина, синтезированного разными микроорганизмами. При этом пятна, полученные на хроматограммах при исследовании культуральных жидкостей, сравнивают с пятнами, полученными на хроматограммах после разгонки и проявления разведений чистого препарата гетероауксина. Шкала (рис. 23) составляется из разведений с содержанием гетероауксина от 1 до 20 мкг на 1 мл (0,5; 1; 2; 4; 8; 12; 16; 20).
Каротин определяют в сухих клетках или во влажной биомассе, полученной центрифугированием культуральных жидкостей или снятием клеток с поверхности агаровой среды.
Для исследования берут точно взвешенную навеску клеток, так как в дальнейшем количество каротина пересчитывают на 1 г.
Для исследования микробных пигментов и выявления в их составе р-каротина можно использовать метод бумажной хроматографии, разработанный Д. И. Сапожииковым с сотрудниками (1965) для растительных объектов и модифицированный А. В. Хо-тяновичем (1965) для анализа микроорганизмов. Порядок определения состоит в следующем.

Рис. 23. Хроматограмма различных концентраций гетероауксина (шкала для сравнения с испытуемыми растворами).
Навеску клеток переносят в фарфоровую ступочку и добавляют окись кальция (СаО) для быстрого высушивания биомассы. СаО в силу своей гигроскопичности быстро отнимает у бактериальных клеток воду, и поэтому можно исключить процедуру их предварительного высушивания в термостате.
Клетки тщательно растирают с толченым стеклом, постепенно добавляя растворитель. Каротиноиды извлекают вначале спиртом, а затем ацетоном. Общее количество растворителей составляет 10—20 мл. Полученную взвесь переносят в стеклянный стаканчик. Для получения экстракции пигментов стаканчик слегка нагревают, а затем экстракт выливают в шоттовскую воронку с фарфоровым фильтром № 3 или № 4. Фильтрат, содержащий пигменты, перешедшие в него из микробных клеток, измеряют в мерном цилиндрике. После этого 2—3 мл фильтрата наносят широкой полосой на нижний край хроматографической бумаги (сорта Ленинградская быстрая), нарезанной размером 15x15 см.
Нанесение жидкости производится при постоянном подсушивании бумаги теплым воздухом. Затем бумагу с нанесенным фильтратом ставят в стеклянный сосуд, на дно которого наливают растворитель — петролейный эфир и бензол в соотношении 1 : 15. Сосуды плотно прикрывают сверху стеклом и темным материалом и оставляют на У2 часа для разгонки.
На восходящей хроматограмме пигменты четко разделяются, давая различно окрашенные полосы. Полоса рукаротина движется вместе с фронтом растворителя, располагаясь в самой верхней части хроматограммы, и имеет желтый цвет. Вслед за ней идет полоса желто-розового цвета — у-каротин. По наличию этих полос на хроматограммах, полученных при разгонке экстрактов из клеток микроорганизмов, судят о их способности к биосинтезу 3- и уизомеров каротина.