Для определения способности микроорганизмов образовывать антибиотические . вещества, подавляющие рост других видов бактерий и грибов, предложен ряд способов, основанных на качественных пробах. Наиболее распространенными из них являются метод штрихового посева, метод наложения блоков и метод колодцев (Н. А. Красильников, 1958; Н. С. Егоров, 1965). Для выявления антагонистических свойств лучше высевать микроорганизмы на питательные среды разного состава: с разными источниками азота и углерода, с добавлением микроэлементов, с различными рН и т. п. Это обусловливается тем, что антибиотическая активность микроорганизмов в разных условиях проявляется неодинаково.
Метод штрихового посева. Испытуемый микроорганизм засевают петлей на поверхность агара в центр чашки Петри или штрихом с одного края чашки и выращивают 4— 6 дней в термостате. За это время на месте посева образуется обильный рост микроорганизма и его продукты жизнедеятельности диффундируют в толщу агара. После этого к выросшей колонии или к штриху подсевают радиальными или перпендикулярными штрихами другие микроорганизмы, взаимоотношения с которыми изучают. По наличию или отсутствию их роста вблизи колонии судят о выделении антибиотических веществ к разным видам микробов.
Метод наложения блоков. Этот метод широко используется в работе при отборе микробов-антагонистов. Он заключается в том, что каждый исследуемый микроорганизм высевают сплошным посевом на агаризованную питательную среду, оптимальную для данного вида, и выращивают в течение нескольких дней для накопления в агаре микробных метаболитов. После этого из агара вырезают пробочным сверлом или другим способом -блоки величиной около 1 см2 и накладывают их на газоны различных тест-микробов — бактерий или грибов. Если в продуктах жизнедеятельности исследуемой культуры содержались антибиотические вещества, то они диффундируют в агар и подавляют рост тест организмов. В результате вокруг блоков получаются зоны отсутствия роста
(см. рис. 17). По величине стерильных зон вокруг блоков можно судить об относительной антибиотической активности микроорганизмов.
Метод колодцев. Метод основан на диффузии в агар антибиотических веществ, накапливаемых микроорганизмами в жидкой питательной среде. Для этого культуральную жидкость закапывают в специальные цилиндрики, расставленные на поверхности агара, или в колодцы, сделанные в агаре пробочным сверлом. Из цилиндриков или колодцев содержащиеся в жидкости антибиотики диффундируют в толщу агара, который предварительно засевают тест культурой, в результате чего вокруг них образуются зоны отсутствия роста.
Если испытуемые микроорганизмы не являются антагонистами и не образуют антибактериальных или антигрибных веществ, то зон отсутствия роста вокруг их колоний, блоков или мест диффузии культуральной жидкости в агар не образуется.