Принцип метода заключается в том, что семена, помещенные в рабочий сосудик, в процессе дыхания в замкнутом пространстве поглощают кислород, а выделяемая ими углекислота тут же связывается щелочью, налитой во внутренний цилиндрик. В результате уменьшается давление воздуха в сосудике и в связанном с ним правом колене манометра. Благодаря этому манометрическая жидкость Броди в правом колене манометра несколько поднимается, а в левом соответственно опускается (рис. 18). По шкале учитывают понижение уровня жидкости в левом колене по сравнению с первоначальной высотой столба за определенный промежуток времени — 30 минут или 1 час (В. В. Умбрейт, P. X. Бур-рис, Дж. Ф. Штауффер, 1951; О. А. Семихатова и М. В. Чулановская, 1965). Ход определения следующий.

Рис. 18. Рабочая часть респирометра Варбурга (общий вид).
1 — верхний край манометра, 2— рабочий сосудик, 3 — цилиндрик для щелочи, 4 — учетная шкала, 5 —нижний зажим.
1. Семена замачивают накануне определения на 24 часа в культуральной жидкости испытуемого микроорганизма, разведенной до оптимальной, ранее подобранной концентрации.
2. Перед определением включают аппарат Варбурга для подогрева в нем воды до постоянной температуры 25°.
3. В цилиндрик, имеющийся на дне рабочего сосудика, наливают пипеткой 0,2 мл 20%-ной щелочи (NaOH).
4. Делают навески испытуемых набухших семян на аналитических весах (около 1 г каждого образца) и переносят их в рабочие сосудики.
5. Сосудики с семенами закрепляют на манометрах.
6. К одному манометру присоединяют пустой сосудик, который является контрольным (так называемый термобарометр).
7. Все манометры с сосудиками вставляют в ванну аппарата с налитой в нее водой. Сосудики с семенами, погруженные в воду с температурой 25°, оставляют качаться 30 минут для их равномерного прогревания.
8. Вращением нижнего зажима манометра устанавливают уровень жидкости Броди в правом колене на отметке 150 и записывают при этом уровень жидкости в левом колене. Это проделывают со всеми манометрами по очереди.
9. Перекрывают верхние краны манометров и замечают время. Оставляют их качаться в аппарате в течение часа.
10. По истечении часа останавливают качание манометров, доводят уровень жидкости Броди в правом колене до 150 и записывают показания шкалы по высоте столба жидкости в левом колене. Таким образом, учитывают, на сколько делений опустилась жидкость в левом колене. То же самое отмечают и для контрольного сосудика.
Изменение показаний манометра у пустого сосудика может зависеть от разных причин, в том числе от изменения температуры в сосудике из-за его трения о воду при качании, от колебания температуры в приборе Варбурга и др.
Расчеты поглощенного кислорода при определении дыхания на аппарате Варбурга состоят в следующем.